服务流程

服务内容及说明

服务项目 服务内容
蛋白质修饰和定量 磷酸化 (-PO43: Ser,Thr Tyr)
甲基化 (-CH3: Lys, Arg, His)
乙酰化 (-CH3CO: Lys)
糖基化(-glycosyl: N-linked Asp, Arg; O-linked Ser, Thr, Tyr)
泛素化(-ubiquitin: Gly-Lys)
SUMO化 (Small Ubiquitin-like Modifier (SUMO), SUMO-1,2,3)
蛋白质构象变化和蛋白质相互作用 活化和失活
由蛋白质相互作用形成的新型抗原表位
朊病毒
表观遗传学 甲基化(-CH3: DNA CpG; mRNA; ChIP)
细胞分化
化学小分子
服务阶段 交付产品
多抗阶段 抗血清
Protein A纯化多抗
抗原亲和纯化多抗
上述样品检测数据
单抗阶段I B细胞上清100-200uL
B细胞上清筛选数据
单抗阶段II 小量重组表达上清(1~3mL)
大量重组表达上清(>30mL)
纯化单抗(0.1mg以上,与抗体产品交付合并)
产品交付 抗体产品(1mg以上,按合同约定的克隆数与质量)
抗体验证报告
其它合同中约定的材料(抗体序列、质粒等)
客户提供
  1. 目的基因序列、20µL以上质粒模板(浓度100ng/µL,无模板可以基因合成);
  2. 构建好的表达质粒或者已表达菌液(表达条件和蛋白SDS-PAGE电泳图);
  3. 多肽路线提供目的基因序列。
交付标准
  1. 抗血清:Protein A纯化多抗;抗原亲和纯化多抗;上述样品检测数据。
  2. 单抗阶段 Ⅰ :B细胞上清100-200uL;B细胞上清筛选数据。
  3. 单抗阶段 Ⅱ :小量重组表达上清(1~3mL);大量重组表达上清(>30mL);纯化单抗(0.1mg以上,与抗体产品交付合并)。
  4. 产品支付:抗体产品(1mg以上,按合同约定的克隆数与质量);抗体验证报告;其它合同中约定的材料(抗体序列、质粒等)。
重组兔单抗优势

· 亲和力高 · 特异性强 · 更多的表位选择 · 批次稳定

重组兔单克隆抗体开发流程 (项目周期:24-32周)

抗原设计和制备

PhaseⅠ: 4-6 周

免疫

Phase Ⅱ: 8-10 周

抗原设计和制备

筛选

Phase Ⅲ: 4-6 周

抗血清收集

细胞分选和富集

B细胞培养与初筛

IgG 基因克隆与第二次筛选

检测及交付

Phase Ⅳ: 8-10 周

载体构建

抗体表达与纯化

验证

重组单抗生产

案例展示

淋巴管标记物病理诊断重组兔单克隆抗体合作开发

利用真核蛋白表达系统和第四代重组兔单克隆技术开发病理诊断抗体,成功实现国产替代,掌握核心知识产权,打破了国外厂家的垄断。重组兔单克隆抗体特异性高、亲和力高、灵敏度高。

人扁桃体
  • 2109  候选B细胞单克隆
  • 203  阳性B细胞单克隆(9.6%)
  • 45   满足WB应用的抗体
  • 3   满足病理诊断要求的单克隆抗体
人结肠
  • 需求: 淋巴管标记物,应用于间皮瘤与腺癌病理诊断
  • 抗原: 靶标蛋白的表面序列重组蛋白
  • 富集: 重组蛋白
  • 筛选: IHC 、ELISA
EGFR突变特异性病理诊断重组兔单克隆抗体开发

人类表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR),属于酪氨酸激酶受体家族,是表皮生长因子(EGF)的受体,促使细胞增殖和信号传导。广泛分布于许多正常的上皮细胞中,特别是在复层上皮和鳞状上皮细胞的基底层。EGFR-L857R是21号外显子L857R点突变,原发性肺腺癌21号外显子L857R点突变占所有EGFR点突变的40%-45%,突变患者可以从EGFR-TKI治疗中获益。

使用EGFR-E746-A750del突变特异性抗体对人肺腺癌(左,存在EGFR-E746-A750del突变)和人肺腺癌(右,存在EGFR-L857R突变)组织进行病理分析。人肺腺癌(左,存在EGFR-E746-A750del突变)为细胞质阳性着色,人肺腺癌(右,存在EGFR-L857R突变)为阴性。
  • 1800  候选B细胞单克隆
  • 158  阳性B细胞单克隆(8.8%)
  • 40   满足IHC应用的抗体
  • 10   满足病理诊断要求的单克隆抗体
使用EGFR-L858R突变特异性抗体对人肺腺癌(左,存在EGFR-L857R突变)和人肺腺癌(右,存在EGFR-E746-A750del突变)组织进行病理分析。人肺腺癌(左,存在EGFR-L857R突变)为细胞质阳性着色,人肺腺癌(右,存在EGFR-E746-A750del突变)为阴性着色。。
  • 需求:  EGFR-L857R病理诊断重组兔单克隆抗体开发
  • 抗原:  多肽
  • 富集:  多肽
  • 筛选:  病理验证
c-Met病理诊断重组兔单克隆抗体开发

c-Met指肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF/c-MET)受体,属于受体酪氨酸激酶家族。许多肿瘤表面表达c-Met蛋白,如胃癌、肺癌、肝细胞肝癌、乳腺癌、甲状腺癌等。c-Met的过度表达是恶性肿瘤增高的一个标志。由于许多肿瘤都存在HGF/c-Met信号途径的异常,该信号途径的抗癌药物已经进入临床使用,检测c-Met对诊断和用药具有指导意义。

  • A549阳性细胞数为75%,记为3分,阳性强度中强,记为2分,综合评分为6分,表达为++;
  • H596阳性细胞数为85%,记为4分,阳性强度弱,记为1分,综合评分为4分,表达为+;
  • H820阳性细胞数为80%,记为4分,阳性强度中强,记为2分,综合评分为8分,表达为++。
  • 1145  候选B细胞单克隆
  • 105  阳性B细胞单克隆(8.8%)
  • 35   满足IHC应用的抗体
  • 5    满足病理诊断要求的单克隆抗体
  • 需求:  c-Met病理诊断重组兔单克隆抗体开发
  • 抗原:  真核表达重组蛋白
  • 富集:  真核表达重组蛋白
  • 筛选:  病理验证

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