服务流程

服务内容及说明

服务项目 服务内容 交付结果 服务周期
单抗定制 ELISA筛选鼠单抗 抗原制备(原核) 19-28周
鼠多抗血清检测
融合及亚克隆筛选
腹水制备抗体
WB筛选鼠单抗 抗原制备(原核) 19-28周
鼠多抗血清检测
融合及亚克隆筛选
腹水制备抗体
IHC/IF筛选鼠单抗 抗原制备(原核) 19-28周
鼠多抗血清检测
融合及亚克隆筛选
腹水制备抗体
修饰性鼠单抗 抗原制备(原核) 19-28周
鼠多抗血清检测
融合及亚克隆筛选
腹水制备抗体
ELISA抗体对(鼠单抗-单抗) 抗原制备(原核) 21-30周
鼠多抗血清检测
融合及亚克隆筛选,抗体对筛选
腹水制备抗体
ELISA抗体对(鼠单抗-兔单抗) 抗原制备(原核) 21-30周
鼠多抗血清检测
兔多抗血清检测
兔多抗纯化及标记
融合及亚克隆筛选,抗体对筛选
腹水制备抗体
客户提供
  1. 目的基因序列、20µL以上质粒模板(浓度100ng/µL,无模板可以基因合成);
  2. 构建好的表达质粒或者已表达菌液(表达条件和蛋白SDS-PAGE电泳图);
  3. 多肽路线提供目的基因序列。
交付标准
  1. 单抗:ELISA效价检测结果,提供1-3株杂交瘤细胞株,选择其中一株提供5 mg以上Protein A/G亲和纯化的抗体,浓度为1 mg/mL以上。
  2. ELISA抗体对(鼠单抗-单抗):提供1对配对的两个杂交瘤细胞株,5 mg以上Protein A/G亲和纯化的抗体,浓度为1 mg/mL以上,针对免疫原的ELISA效价在1:64000以上,其中1个抗体生物素标记;
  3. ELISA抗体对(鼠单抗-兔多抗):提供1-4对配对抗体(单抗-多抗)。单抗: 4株杂交瘤细胞株对应的5 mg以上Protein A/G亲和纯化的 抗体,浓度为1 mg/mL以上,提供1-4株杂交瘤细胞株。多抗:2mg以上生物素标记的抗体,浓度为1 mg/mL以上。

解决方案

ABclonal标准鼠单克隆抗体制备采用最优化的制备流程,所需时间也最短。深受广大科研用户的好评。鼠单抗制备选用五只SPF(Specific Pathogen-Free)级小鼠,采用完全弗氏佐剂(CFA)和不完全弗氏佐剂(IFA)皮下多点注射。ABclonal保证所有免疫动物都注射同一抗原。

流程 时间 描述
阴性血清采集 Day0 免疫前血清采集 (20uL/只)
一免 Day 1 0.5mg免疫原(CFA), 皮下多点注射(10点)
二免 Day 14 0.25mg免疫原(IFA), 皮下多点注射(4点)
三免 Day 28 0.25mg免疫原(IFA), 皮下多点注射(4点)
四免 Day 42 0.25mg免疫原(IFA), 皮下多点注射(4点)
抗血清采集 Day 56 抗血清发送客户检测 (20uL/只)
ELISA 检测 Day 60 根据ELISA检测结果,决定是正常牺牲小鼠还是调整免疫周期
冲击免疫 Day 62 0.25mg免疫原(盐水), 腹腔
融合及亚克隆筛选 Day 76 骨髓瘤细胞和脾细胞融合, 克隆筛选(HAT培养筛选; ELISA, WB, DOT-BLOT, IF, 中和/阻断等
细胞定株扩大 Day 118 克隆筛选
腹水制备及纯化 Day 132 5 mg以上Protein G亲和纯化的抗体,浓度为1 mg/mL以上
内源样本验证 Day 139 保证客户能用于目的实验

备注:56天之后,项目周期的具体时间不是确定的,需要根据抗血清ELISA效价检测情况。

服务特色

鼠单抗制备

  • 杂交瘤细胞融合和鼠单抗制备

保证阳性克隆

  • WB阳性克隆
  • 其他应用(根据情况)

个性化

  • 客户根据筛选结果或自检结果决定哪一只小鼠进行细胞融合以及哪一株细胞进行亚克隆以和放大

一站式服务

  • 提供从免疫原制备到抗体测序一站式服务

快速和经济节约筛选

  • 先进的抗体检测平台
  • 经验丰富的抗体检测人员

高质量高原

  • 免费抗原设计
  • 高质量的重组蛋白表达
  • 高质量多肽(HLPC和MS质检)
高通量阳性克隆筛选

ABclonal拥有经验丰富的抗体检测技术人员、完善的抗体检测设备、先进的高通量抗体检测技术,可以为客户定制抗体进行全方位验证。万级细胞房, Mini WB, IHC芯片,多肽芯片,修饰性抗体检测平台等实现高通量细胞上清内源验证,提高阳性克隆筛选速率,更快更好的拿到符合课题需求的阳性细胞株。

ELISA 筛选

ELISA筛选是单抗筛选中主要的筛选手段,可以从细胞中筛选到有效的阳性克隆,但ELISA实验无法区分假阳性,需要综合其他筛选手段。

内源WB筛选

细胞融合前,ABclonal会对每只小鼠血清中抗体水平进行检测,选取最佳的小鼠进行融合。

细胞融合后,ABclonal采用MINI-WB筛选系统对阳性细胞株的细胞上清进行批量检测。

IHC芯片筛选

制备鼠单抗是一件极其容易的事情,很多生产厂家都能实现,但拿到优质的满足客户需求的鼠单抗却是一项艰巨的任务,ABclonal有着丰富鼠单抗制备经验,每一步都严格质控,优化,高通量全方位为客户筛选,竭诚为客户提供满意的结果。

IF/IP筛选

对于IF/IHC/IP等更高要求,ABclonal采用多种阳性细胞株通量制备腹水,对腹水中抗体的质量进行相关的实验检测。

案例展示

病毒中和抗体开发

利用经典杂交瘤鼠单克隆技术,为客户开发肠道病毒治疗抗体。通过多种实验方案和筛选方案,筛选出多株识别不同人类肠道病毒的特异性单抗,得到有中和活性的高品质鼠单克隆抗体。疫苗和抗体药同时开发,为治疗肠道病毒提供了解决方案。

单抗与四种不同方式制备的肠道病毒抗原反应

  • 筛选出多株识别不同肠道病毒(Human Enterovirus)的特异性单克隆抗;

  • 筛选出两株单抗(上图所示10G2和1F2)具有中和活性,纯化腹水中和效价大于1:2048。其中,10G2和1F2均识别空间表位,且均为肠道病毒中具有重要生物学活性的表位;

  • 筛选出一株单抗可以识别多种肠道病毒通用表位。

病毒中和/阻断抗体开发

诺如病毒,又称诺瓦克病毒(Norwalk Viruses,NV ),是人类杯状病毒科(Human Calicivirus,HuCV)中诺如病毒(Norovirus,NV)属的一种病毒。诺如病毒感染性腹泻在全世界范围内均有流行,全年均可发生感染,诺如病毒感染性腹泻属于自限性疾病,没有疫苗和特效药物,因此研究极具挑战。

ABclonal定制开发的诺如蛋白衣壳蛋白(Antigen 1)鼠单抗(mAb)能有效阻止诺如病毒样颗粒与人体受体蛋白HBGA的结合,阻断效果与多克隆抗体(PcAb)相当,且不会与其它基因型(Antigen 2)的病毒颗粒产生交叉反应。 该单抗能识别native状态的蛋白,而不能识别变性后的蛋白,说明抗体的识别表位为构象表位,而不是线性表位。

ELISA测试阻断活性

单抗表位特性检测

在线询价


基础信息

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  • 2. 对于批量订单,请发送至邮箱cn.market@abclonal.com,欢迎电话垂询400-999-6126。