制剂
组分###摩尔浓度###质量浓度|||
PMA### 40.5 μM### 25 μg/mL|||
Ionomycin ###670 μM ###0.5 mg/mL|||
Brefeldin### A 5.3 mM ###1.5 mg/mL|||
Monensin ###1 mM### 0.7 mg/mL
描述
Cell Stimulation Cocktail (Protein Transport Inhibitors Plus, 500×)
储存
Store at -20℃
(1)未开盖的干粉蛋白在 -20°C至-80°C可保存12个月;复溶之后,蛋白溶液在-20°C及以下可保存3个月,在2-8℃可保存1周;
(2)干粉蛋白复溶浓度建议在0.1-0.5 mg/mL,不能低于0.1mg/mL,长期储存请添加保护剂(如0.1%BSA),并分装保存,避免反复冻融;
(3)液体蛋白的保存温度及效期请参考说明书,如对液体蛋白浓度有要求,请提前咨询销售或者技术支持。
复溶
本产品以溶于乙醇的母液形式提供,经过 0.22μm 滤膜过滤除菌,可以直接使用,方
便操作。收到重组蛋白产品之后请检查蛋白冻干粉末是否贴于瓶底,如果粉末浮起,开盖之前请先低温离心。将蛋白用说明书中指定的缓冲液复溶至0.1-0.5 mg/mL(请注意蛋白复溶浓度不能低于0.1 mg/mL),室温平衡5-10 min保证充分溶解,复溶过程中请不要剧烈涡旋及吹打蛋白溶液。如需长期储存,建议复溶时添加载体蛋白或者稳定剂(如0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS 或者 5% 海藻糖),同时将复溶后的蛋白溶液按照需求进行分装,储存于-20°C至-80°C,随取随用,避免反复冻融。
请在蛋白复溶计算器中输入蛋白总质量和所需终浓度,快速计算您需要添加溶液的体积吧!
细胞刺激混合物(含蛋白转运抑制剂,500×)包含佛波酯(PMA,PKC 激活剂)、离
子霉素(Ionomycin)、布雷非德菌素 A(Brefeldin A,ATPase 抑制剂)和莫能菌素
(Monensin)。PMA 刺激细胞激活 Protein kinase C(PKC),可以引起下游众多蛋白激
酶的磷酸化,形成级联反应,引起细胞活化。Ionomycin 是一种来源于 Streptomyces
conglobatus 的聚醚类窄谱抗生素,是一种有效的 Ca
2+载体,高度选择性结合 Ca
2+(也能
转运其他离子,但亲和力相对较低)。Ionomycin 通过直接刺激钙池调控钙内流,提高胞
内 Ca
2+水平。PMA 常与 Ionomycin 联用,刺激免疫细胞活化。同时加入蛋白转运抑制剂
Brefeldin A 和 Monensin 阻止高尔基体将新分泌蛋白运输到细胞外,以增强细胞内细胞因
子的检测。