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Rabbit Control IgG (AC005)

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Immunoprecipitation of over-expressed DDDDK-tagged protein in 293T cells incubated using DDDDK-tag antibody (AE063). Secondary antibody: HRP-conjugated AffiniPure Mouse Anti-Rabbit IgG Light Chain (AS061).A mock served as negative control using rabbit Control IgG（AC005）and over-expressed 293T cell lysate served as positive control.

Chromatin immunoprecipitation was performed with 15 μg of cross-linked chromatin from HeLa, using 5 μg of Rabbit Control IgG (AC005) and CTCF Rabbit pAb (A1133). The enrichment of immunoprecipitated DNA at different genomic loci was examined by quantitative PCR. The histogram compares the ratio of the immunoprecipitated DNA to the input at given loci.

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货号: AC005
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详细信息

推荐稀释比
  • IP0.5ug-4ug antibody for 200ug-400ug extracts of whole cellsCh5μg antibody for 10μg-15μg of Chromatin
浓度查询

请输入产品标签上的lot号，例如4000000001

反应物种
同种型
IgG
产品形式
Liquid
偶联物
Unconjugated
存储缓冲液
Store at -20℃. Avoid freeze / thaw cycles.
Buffer: PBS with 0.05% proclin300,50% glycerol,pH7.3.
纯化方式
Potein A/G purification

抗原信息

免疫原
None
序列
Email for sequence
进行序列比对

用户验证的应用

应用及物种
  • IP (Mus musculus , Oryza sativa , Homo sapiens , Mus musculus , Xanthonycticebus pygmaeus , Homo sapiens , Oryctolagus cuniculus , Sus scrofa , Rattus norvegicus , Anatinae , Bos taurus)
  • WB (Mus musculus , Homo sapiens , Arabidopsis thaliana , Sus scrofa , Rattus norvegicus , Homo sapiens , Mus musculus , Glaesserella parasuis , Ctenopharyngodon idellus , Cyprinus carpio Linnaeus , Cyprinus carpio , Plutella xylostella , Shrimp , Bos taurus)
  • Co-IP (Mus musculus , Homo sapiens , Penaeus vannamei , Cricetulus griseus , Rattus norvegicus)
  • ChIP (Mus musculus , Rattus norvegicus , Oryza sativa L. , Homo sapiens , Capra hircus)
  • IF (Homo sapiens , Mus musculus , Rattus norvegicus)
  • RIP (Mus musculus , Scapharca Broughtonii , Sus scrofa , Homo sapiens , Drosophila melanogaster , Drosophila)
  • CO-IP (Homo sapiens , Mus musculus)
  • CHIP (Homo sapiens , Mus musculus , Arabidopsis thaliana , Mus musculus , Rattus norvegicus , Drosophila melanogaster , Homo sapiens)
  • ChIP-qPCR (Zea mays)
  • IHC (Mus musculus , Rattus norvegicus)
  • Chip (Homo sapiens)
  • WBChIP (Homo sapiensMus musculus)
  • CUT&Tag (Homo sapiens , Mus musculus , Oryza sativa , Other)
  • chip (Drosophila melanogaster)
  • RIP Assay (Sus scrofa)
  • ChIP-seq (Mus musculus)
  • Hcp protein secretion assay (aeromonas hydrophila)
  • ChIP-Seq (Mus musculus)
  • PCR (Mus musculus)
  • iRIP-seq (Oryctolagus cuniculus)

背景信息

The protein encoded by this gene is a transcriptional regulator and tumor suppressor, serving as an activator of genes involved in both innate and acquired immune responses. The encoded protein activates the transcription of genes involved in the body's response to viruses and bacteria, playing a role in cell proliferation, apoptosis, the immune response, and DNA damage response. This protein represses the transcription of several other genes. As a tumor suppressor, it both suppresses tumor cell growth and stimulates an immune response against tumor cells. Defects in this gene have been associated with gastric cancer, myelogenous leukemia, and lung cancer.

RRID
AB_2771930

关联靶点

以Control IgG为关键词搜索文献记录，得到上述基因与Control IgG的研究紧密相关，排序顺序根据研究相关程度由高到低决定。（所显示数字代表两者共同出现的已发表文献数量）
◀1/▶

关联领域

以Control IgG为关键词搜索文献记录，得到上述相关热词信息，可反映出Control IgG的研究趋势与热点。（关联领域与基因名称的距离代表其研究热度）

* 该数据来源于赛特新思(citexs.com)
来自于发表文献，仅供参考所用，ABclonal不承担任何责任。

暂无以Control IgG为关键词搜索的文献记录。

该服务由赛特新思提供，上述关联分析来自已发表文献，仅供参考所用，ABclonal不承担任何责任。

FAQ

折叠内容

ABclonal公司的抗体，可以回收利用几次？

首先，一般抗体不推荐客户回收利用，抗体使用之后缓冲体系已经发生改变，不同客户在回收抗体的保存条件上也会有差异，所以抗体回收使用效果无法保证。另外，ABclonal公司也做过一批抗体回收验证测试，测试结果显示不同抗体可回收次数不同，一般效价越高的抗体，可重复使用的次数越多，客户可根据实验情况来确定。
注：我们将孵育完毕后剩余的抗体回收到离心管中置于4℃保存，效价高的抗体可至少保存1周，至少重复利用3次。

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ABclonal作为国产抗体品牌的优势？

武汉爱博泰克生物（ABclonal）科技有限公司是国产品牌，她成立于2011年，公司依托ABclonal美国波士顿抗体与蛋白研发中心、中国光谷生物城(武汉)抗体生产基地以及上海张江分子酶研发中心，凝聚了十余位来自哈佛大学、麻省理工、复旦大学、上海交大、中科院生化细胞所和武汉大学的全球知名分子和免疫学方面博士，组成我们的科学家团队，通过聚焦抗体与酶核心技术，致力于打破国际技术的垄断，将公司打造成为科研工具和诊断原料的国内领导品牌，乃至弯道超越国际巨头。 我们拥有包括兔多克隆抗体、小鼠单克隆抗体、兔单克隆抗体的生产研发平台，同时也有包括WB,IHC,IF,IP,CHIP在内的检测平台，我们对每一支自产的抗体进行了严格的检测。当然，我们部分直销地区也可以帮客户代购进口品牌的产品。同时也有抗体定制服务。ABclonal抗体优势：1，严自检，保质量；2产品多，指标全；3，价格低，货期短。注：ABclonal抗体价格体系详情见附件

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ABclonal抗体成分？

ABclonal抗体成分在平时工作当中，常会有客户咨询我们的抗体用的什么buffer进行保存，一般来说，我们的buffer的成分是：PBS含0.03%的proclin300、0.05%牛血清白蛋白、50%甘油；也有一些是PBS含0.03%的proclin300，50%甘油。防腐剂 Proclin 300活性成分主要是2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮（MCI）和5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮（CMCI）。ProClin生物灭活剂能够迅速穿透细胞膜，抑制对细胞呼吸至关重要的特定酶，因此一接触微生物有机体就会立即抑制细胞活性。ProClin的多个特定毒性位点可以防止微生物产生高水平的耐药性。

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实验方案

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IP

IP检测

一、实验试剂

  • （1）Protein A/G Magnetic beads
  • （2）裂解液&洗杂液：Cell lysis buffer for IP (without inhibitors)（RM00022）
  • （3）蛋白酶抑制剂(RM02916)
  • （4）封闭液：含 3 %BSA 的 1X PBS
  • （5）1×PBS 缓冲液(RM00012)
  • （6）5× SDS sample buffer
  • （7）Control IgG （AC005/ AC011/AC034）

二、实验步骤

1、样本处理

（1）贴壁培养细胞

  • a. 去除贴壁细胞的培养液，用PBS或无血清培养基清洗1次，低速离心，弃上清，留取沉淀。
  • b. 107细胞加入1ml Cell lysis buffer for IP（已加入蛋白酶抑制剂）,移液器轻轻吹打，使裂解液和细胞充分接触。2-8℃旋转15min，20转/min。
  • c. 低温下超声1min。
  • d. 12000rpm，4℃离心10min，小心吸取上清。

（2）悬浮培养细胞

  • a. 低速离心悬浮细胞，弃上清，收集沉淀。
  • b. 107细胞加入1ml Cell lysis buffer for IP（已加入蛋白酶抑制剂），移液器轻轻吹打，使裂解液和细胞充分接触。2-8℃旋转15min，20转/min，充分裂解后应无明显沉淀。
  • c. 低温下超声1min。
  • d. 12000rpm，4℃离心10min，小心吸取上清。

（3）组织样本

  • a. 把组织剪切成细小的碎片。
  • b. 取液氮或超低温冰箱中冷冻30min以上的组织，迅速用液氮研磨，研磨过程尽量控制在1~2min之内，以减少蛋白的降解,按照每100-200mg组织加入1ml Cell lysis buffer for IP（已加入蛋白酶抑制剂）。
  • c. 4℃旋转混匀裂解15min。
    （步骤b，c也可采用以下过程：每100-200mg组织加入1ml Cell lysis buffer for IP（已加入蛋白酶抑制剂）。低温下用玻璃匀浆器或组织研磨器匀浆，直至充分裂解，过程尽量控制在1~2min之内，以减少蛋白的降解。）
  • d. 低温下超声2min。
  • e. 12000rpm，4℃离心10min，小心吸取上清。
2、磁珠预处理
  • （1）将Protein A/G Magnetic beads颠倒或漩涡混匀，翻转瓶身发现底部无黑色沉淀即可。
  • （2）取10-15μl Protein A/G beads至新的EP管中，放在磁力架上，待溶液澄清后，用移液器吸弃保护液。
  • （3）将EP管从磁分离器上取下来，加入1ml Cell lysis buffer for IP混匀，放置在磁力架上收集磁珠，用移液器吸弃洗杂液，重复2次。
  • （4）将EP管从磁分离器上取下来，加入1mL的3% BSA，置于翻转混合仪4℃封闭1h.
  • （5）重复步骤3），备用。
3、磁珠、抗原-抗体复合物结合
  • （1）将含有抗原的样品（300μl，总蛋白量200-1000μg，剩余体积用 Cell lysis buffer for IP（已加入蛋白酶抑制剂）补齐）中加入目标抗体（0.5-5μg），置于翻转混合仪4℃下反应2h或过夜。
  • （2）将上述完成抗体-抗原结合的复合物与备用好的磁珠进行混合，置于4℃下反应2h。
  • （3）将上述磁珠-抗体-抗原复合物放在磁力架上进行分离，收集上清液，以备后续检测。
  • （4）向离心管中加入1mlCell lysis buffer for IP，用移液器轻轻吹打使磁珠-抗体-抗原复合物均匀分散，然后进行磁力架分离，弃上清液；从磁力架上取下离心管，重复洗涤3次，共洗涤4次。
4、抗原洗脱

（1）变性洗脱

此方法洗脱的样品适用于SDS-PAGE检测。

  • a. 从磁力架上取下离心管，向其中加入35μl 1X SDS sample Buffer混合均匀，室温静置10min，置于磁力架上进行磁性分离，收集上清液。
  • b. 加入10X DTT，95℃加热10min，进行SDS-PAGE检测。

（2）非变性洗脱

  • a. 向磁珠-抗体-抗原复合物中加入35μl洗脱液，混合均匀，室温孵育10min。
  • b. 置于磁力架上进行磁性分离，收集洗脱液至新的EP管中。
  • c. 加入中和液中和至pH7.0-8.0。用于后期功能分析。
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