产品信息
产品描述
Golden Gate 2X Assembly Mix (Eco31Ⅰ)是一款基于IIS内切酶Eco31Ⅰ（BsaI的同裂酶）进行开发的无缝克隆预混液，可以一次实现多至4个插入片段的特定顺序组装克隆。
通过PCR在DNA片段两端加上Eco31Ⅰ识别位点（GGTCTC）和不同的切割位点序列，由于IIS型限制性内切酶识别非回文序列，切割位点在识别序列外部，切割后产生4碱基粘性末端指导定向组装，且识别序列在酶切过程中被除去，不会残留在连接产物中，从而酶切反应和连接反应可以同步进行，实现一步无缝连接。无缝组装后的产物是完全封闭的双链DNA，可直接用于下一步PCR或其它分子生物学操作。
产品特点
- 快速便捷：边切边连，操作简单，节约时间；
- 灵活高效：对于sg DNA片段、单片段和多片段，都能高效连接；
- 存储稳定：试剂反复冻融30次，或在25℃存放7天，性能无明显变化。
产品应用
无缝克隆、基因编辑、基因合成、基因工程
产品保存
Store at -20℃
产品组分
| 组分名称 | 规格1 | 规格2 |
| Golden Gate 2X Assembly Mix (Eco31Ⅰ) | 100 μL | 5 × 100 μL |
1. Golden Gate 2X Assembly Mix (Eco31Ⅰ)介导的克隆原理
2. Sg DNA酶切连接效率测试
- 选择3个不同的编码Sg RNA的DNA片段（20 bp）分别进行连接测试，结果显示：克隆阳性率均大于90%。
3. 不同大小/数目片段酶切连接效率测试
- 选择不同长度（250 bp、1 kb、2 kb），和不同数目（2片段、4片段、10片段）的DNA片段，分别进行克隆连接测试，各挑取10个单克隆进行菌落PCR验证，结果显示：克隆阳性率基本≥90%，10片段连接成功率也可以达到80%。
FAQs
说明书
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